TUNEL-Methode

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Die TUNEL-Methode (TdT-mediated dUTP-biotin nick end labeling) dient der Darstellung von Zellkernen apoptotischer Zellen. „TdT“ steht für „terminal desoxynucleotidyl transferase“, ein Enzym, das in einem Zwischenschritt der Technik verwendet wird.

Methode[Bearbeiten | Quelltext bearbeiten]

Während der Apoptose wird der Desoxyribonukleinsäure-Strang (DNA-Strang) des Zellkerns durch die Aktivität von Endonukleasen fragmentiert. Die an den Bruchenden freiwerdenden Hydroxygruppen (3'-OH-Gruppen) werden durch das Enzym TdT mit markierten Nukleotiden versehen, welche z. B. aufgrund von Fluoreszenz mit entsprechenden Mikroskopen sichtbar gemacht werden können.

Die Methode wurde 1992 erstmals beschrieben.[1] An der Methode wurde in den darauffolgenden Jahren Kritik geübt, da eine Unterscheidung zwischen nekrotischen und apoptotischen Zelluntergängen nur bedingt möglich war.[2] In den Jahren darauf wurde beschrieben, wie die Technik hinsichtlich auftretender Probleme modifiziert und verbessert werden kann.[3][4][5]

Weblinks[Bearbeiten | Quelltext bearbeiten]

Einzelnachweise[Bearbeiten | Quelltext bearbeiten]

  1. Y. Gavrieli u. a.: Identification of programmed cell death in situ via specific labeling of nuclear DNA fragmentation. In: J Cell Biol. 119, 1992, S. 493–501. PMID 1400587
  2. B. Grasl-Kraupp u. a.: In situ detection of fragmented DNA (TUNEL assay) fails to discriminate among apoptosis, necrosis, and autolytic cell death: a cautionary note. In: Hepatology. 21(5), Mai 1995, S. 1465–1468. PMID 7737654
  3. A. Negoescu u. a.: Importance of DNA fragmentation in apoptosis with regard to TUNEL specificity. In: Biomed Pharmacother. 52(6), 1998, S. 252–258. PMID 9755824
  4. F. Labat-Moleur u. a.: TUNEL apoptotic cell detection in tissue sections: critical evaluation and improvement. In: J Histochem Cytochem. 46(3), Mar 1998, S. 327–334. PMID 9487114
  5. A. Negoescu u. a.: In situ apoptotic cell labeling by the TUNEL method: improvement and evaluation on cell preparations. In: J Histochem Cytochem. 44(9), Sep 1996, S. 959–968. PMID 8773561